Desarrollo de nuevos inhibidores de la interacción entre el receptor her2 y la proteína adaptadora grb2

Resumen

Dentro del amplio arsenal de las terapias oncológicas modernas, una en especial, la quimioterapia dirigida, ha atraído la mayoría de los esfuerzos de universidades y laboratorios farmacéuticos alrededor del mundo en los últimos 20 años. El desarrollo de fármacos capaces de bloquear una o más vías oncogénicas de manera específica, ha ofrecido la posibilidad de duplicar la supervivencia y aumentar las tasas de curación de millones de pacientes. Entre estos fármacos se encuentran los inhibidores de la señal mitogénica activada por receptores de factores de crecimiento como HER2 (Human Epidermal growth factor Receptor 2), implicado en el desarrollo de tipos altamente agresivos de cáncer, especialmente de mama. Esta tesis doctoral está dirigida al desarrollo de moléculas pequeñas capaces de inhibir la interacción entre HER2 y su proteína adaptadora Grb2 (Growth factor receptor-Bound protein 2), responsable de la transmisión de la señal mitogénica al núcleo y por tanto de la multiplicación c elular. Para ello, se ha llevado a cabo un diseño racional de nuevos compuestos de naturaleza no peptídica capaces de unirse al dominio SH2 de Grb2 de acuerdo con la siguiente metodología: 1. Teniendo en cuenta la estructura cristalográfica del com plejo Grb2-SH2 con el ligando pentapeptídico de alta afinidad 2-Abz-Glu-pTyr-Ile-Asn-Gln-NH2, se han diseñado y sintetizado dos series de compuestos que mantienen todas (serie I) o algunas (serie II) de las interacciones con el dominio SH2 de Grb2. 2. Con el fin de determinar la capacidad de los compuestos sintetizados para unirse al dominio SH2 de Grb2, se ha puesto a punto un ensayo competitivo tipo ELISA. De todos los compuestos estudiados, el derivado (S)-1k de la serie I mostró el valor má s elevado de afinidad (CI50 = 174 ?M). 3. El modo de unión de (S)-1k a Grb2-SH2 ha sido validado experimentalmente empleando estudios de RMN (HSQC). A partir de esta información se ha llevado a cabo la optimización de (S)-1k mediante la introducció n de restricciones conformacionales en su estructura, lo que permitió la obtención del derivado (S)-1l. Éste, con un valor de CI50 de 56 ?M, es actualmente uno de los compuestos no peptídicos con mayor afinidad por Grb2-SH2. 4. El compuesto (S)-1 l fue además estudiado in vitro en sistemas celulares, incluyendo células de carcinoma mamario MCF7-HER2 positivas (MCF7-HER2 ) y negativas (MCF7-HER2-), así como en fibloblastos N1 como modelo de células no tumorales. Los resultados obtenidos mostra