Efecto de las repeticiones expandidas en la ataxia de Friedreich GAA TTC sobre el proceso de replicación y recombinación del DNA

Resumen

La ataxia de Friedreich es una enfermedad neurodegenerativa causada por la expansión de las repeticiones GAA.TCC en el intrón 1 del gen FRDA.En esta tesis se ha estudiado el efecto de esta secuencia repetida sobre el avance de las horquillas de replicación y el proceso de recombinación en plásmidos de Escherichia coli.Hemos encontrado que se produce una atenuación de las horquillas cuando la secuencia (TTC)n actúa como molde de la hebra retrasada durante la replicación.Esta pausa tiene lugar en la zona previa a los tripletes.Efectos podrían ser explicados como consecuencia de la formación de un DNA tríplex dentro de las repeticiones como consecuencia del carácter homopurina.homopirimidina de la secuencia.La inestabilidad de las repeticiones, no parece ser debida sólo a la presencia de la pausa de la replicación,sino que parece haber otra u otras causas. Por otro lado,hemos encontrado que independientemente de la orientación , las repeticiones GAA.TCC inducen la acumulación de moléculas con forma de X,consistentes en dos moléculas plasmídicas unidas por una unión de tipo Holliday (HJ) localizada en las repeticiones.Esto podría estar relacionado con la capacidad del DNA tríplex para bloquear la migración de las uniones de Holliday. La resolución asimétrica de estas uniones de Holliday dentro de las repeticiones podría ser una fuente de inestabilidad común a las dos orientaciones.No obstante, no descartamos otras posibles causas del bloqueo de las uniones de Holliday como la formación asimétrica de las mismas dentro de las repeticiones o la heterogeneidad en el número de repeticiones entre los plásmidos que recombinan