Estudio de la expresión del gen ankk1 y de su relación con la función dopaminérgica en líneas celulares y modelos animales

Resumen

La siguiente tesis tiene como objetivo principal determinar ¿Cuál es la relación entre el sistema dopaminérgico y ANKK1? Esta pregunta surge al observar que en el exón 9 de esta RIP quinasa se encuentra el polimorfismo más ampliamente estudiado en re lación a una serie de trastornos psiquiátricos, en especial las adicciones, relacionados con el sistema dopaminérgico. La presencia de ANKK1 en la glía radial, precursora de las células que formaran el sistema nervioso maduro hacen que ANKK1 no solo pueda relacionarse con la dopamina en el adulto, sino que sugieren una interacción durante los procesos de desarrollo embrionario en los cuales la dopamina actúa como morfógeno en lugar de cómo neurotransmisor o precursor. Nuestros estudios parten d e los análisis de la secuencia del gen ANKK1 donde se observa que es un gen adyacente y solapante con el gen DRD2 con el que comparte una gran similitud a nivel de su región promotora, lo cual podría indicar una regulación compartida entre ambos gene s. Los sitios de unión para factores de transcripción encontrados y los datos ya conocidos acerca de la regulación transcripcional del gen DRD2, nos permiten realizar un primer acercamiento a la regulación de la expresión del gen ANKK1 tras la acción del ácido retinoico en líneas de neuroblastoma y astroglioma. Durante el proceso de diferenciación inducido por este derivado de la vitamina A, el cual participa activamente en el desarrollo embrionario, observamos que la presencia de la Caspasa 8, fundamental en la regulación de las RIP quinasas y determinados componentes de la cascada de señalización mediada por PLC, son fundamentales para que el ácido retinoico afecte a la expresión de ANKK1. Para determinar el efecto de la regulación dopam inérgica sobre ANKK1 en la edad adulta, utilizamos un cultivo primario de astrocitos, en el cual comprobamos que existen vías opuestas de regulación dependientes del estímulo dopaminérgico externo y el receptor afectado y en el que la señalización fo sfolipídica generada es fundamental. La ruta de PLC implicada en la estimulación de los receptores D5 o los heterodímeros D1-like/D2 y la vía mediada por PLD tras estimulación del receptor D3 causan respectivamente un aumento y una disminución de l os niveles de ANKK1 en un efecto no exclusivo de astrocitos puesto que los modelos murinos utilizados mostraban el mismo patrón. Así mismo, nuestros estudios mostraron que el incremento de los niveles de calcio intracelular aumentaba la expresión de