Estudio del efecto de la darbepoetina alfa en isquemia-reperfusión renalsu uso como agente protector y reparador del daño renal isquémico

Resumen

La isquemia es una de las causas más frecuentes de fracaso renal agudo (FRA). El daño renal por isquemia trasplantes de riñón retrasa la función inicial afectando a la viabilidad posterior del injerto. El daño renal producido por la isquemia afecta p rincipalmente a las células del epitelio tubular proximal, especialmente las que se encuentran en el segmento S3. Estas células son sensibles a la falta de oxígeno y nutrientes, observándose como alteraciones más características: rotura de uniones in tercelulares y pérdida de adhesión a membrana basal, pérdida del recubrimiento epitelial tubular, disrupción de la membrana basal tubular y formación de edemas intersticiales. La aproximación terapéutica empleadas hasta la actualidad no han mostrado una gran eficiencia en la reducción del daño renal por I/R. En este trabajo hemos estudiado el efecto de la administración de la molécula de Darbepoetina alfa (DPO), en el daño por isquemia/reperfusión (I/R), con el objetivo final de identificar est e compuesto como una nueva opción terapéutica en esta situación clínica. Para ello hemos puesto a punto un modelo animal en ratones (C57BL-6) de I/R renal y un modelo celular de hipoxia/reoxigenación (H/R), que reproduce el daño por I/R en células ep iteliales tubulares proximales de ratón (MCT), en el cual se ha ensayado DPO. Nuestros resultados demuestran de forma novedosa que la administración de una dosis de DPO tras la isquemia ejerce un efecto protector, por promover mantenimiento de la est ructura tubular y las uniones intercelular y a matriz extracelular. El mantenimiento de la estructura, a nivel tisular y celular por DPO, se ejerce por la protección de la despolimerización y desorganización del citoesqueleto de actina y la desestruc turación de la red de microtúbulos. Además, la DPO evita la desintegración de las uniones intercelulares, promueve la adhesión a matriz extracelular y reduce la deslocalización en proteínas integrante de los complejos de adhesión focal. También corr oboramos el efecto citoprotector de promoción de supervivencia/proliferación, mediado por rutas de señalización, entre las que se encuentra MAPK/ERK y PI3K. Observando un adelantamiento de éstas inducido por la administración de DPO, que minimizan el menor daño sufrido tras la I/R e H/R. Además en nuestro modelo hemos demostrado que DPO promueve la proliferación celular. Estudiamos alguna de las rutas de señalización que median el efecto beneficioso de DPO en nuestro modelo. DPO activa la ruta d