Mecanismos moleculares de la activación del gen de procolágeno alfa 1(i) por el hierro

Resumen

En las enfermedades que cursan con aumento del depósito de hierro en los tejidos, el hígado es el principal órgano dañado, y en él es característica la fibrosis hepática en ausencia de inflamación. Los objetivos del presente trabajo han sido conocer los efectos de las sales de hierro sobre la expresión del gen del procolágeno alfa1(I) y los mecanismos por lo que los producen. Con este fin, utilizamos cultivos confluentes de células estrelladas del hígado tratados con sales de hierro. Este tratamiento provocó un aumento del grado de lipoperoxidación celular, y una disminución de los niveles de GSH intracelular. Además, estos cambios se asociaron con un aumento slectivo de la producción de colágeno respecto al total de proteínas sintetizadas. El pretratamiento de las células con antioxidantes inhibió los efectos de las sales de hierro sobre el gen de procolágeno alfa1(I), indicando la posible mediación del estrés oxidativo en su efecto. Estudios paralelos sobre los efectos de las sales de hierro y del MDA, producto derivado de la lipoperoxidación de membranas biológicas, indicaron que ambos factores estimulan el gen de colágeno a nivel transcripcional. Los efectos positivos sobre el ARNm del colágeno alfa1(I), fueron dependientes de la dosis y el tiempo y requerían la síntesis "de novo" de proteínas. La participación de los aldehídos reactivos fue demostrada por el hecho de que inhibidores de la formación de complejos aldehido-proteína (aductus), anulaban los efectos de las sales de hierro sobre el gen de procolágeno alfa1(I). El efecto sobre el promotro del gen se estudió transfectando las células con el plásmido COLCATl, que contienen el promotor del gen de procolágeno alfa1(I) murino unido al gen de la cloranfenicol acil transferasa. Tras realizar delecciones sucesivas del promotor, determinamos que el efecto de las sales de hierro y el MDA se ejercía a través de la región comprendida entre