Análisis y diagnóstico molecular de fusarium verticillioides y otras especies del complejo gibberella fujikuroi productoras de fumonisinas

Résumé

Las especies del complejo Gibberella fujikuroi, particularmente Fusarium verticillioides, se han estudiado profusamente utilizando distintas metodologías dada su importancia en diversas áreas de la biología. En esta Tesis Doctoral nos hemos centrado principalmente en la región espaciadora intergénica del rDNA (IGS) utilizando la técnica de reacción en cadena de la polimerasa - polimorfismo en la longitud de los fragmentos de restricción (PCR-RFLPs) para detectar la variabilidad a nivel intraespecífico en Fusarium (capítulos 2 y 3). La secuenciación de esta región del rDNA en varias especies de Fusarium sirvió para diseñar cebadores específicos de F.verticillioides y de aislamientos productores y no productores de fumonisinas de esta especie (capítulo 4). La secuencia de la región IGS se ha utilizado también para realizar la filogenia de los aislamientos productores y no productores de fumonisinas de F.verticillioides junto con la secuencia del gen del factor de elongación 1 (EF-1) mediante el análisis "multilocus" (capítulo 5). También se han analizado algunos de los genes relacionados con la biosíntesis de las fumonisinas a nivel de DNA y de su expresión, principalmente el gen fum5 que codifica para una polikétido sintetasa. Por otra parte, se han diseñado cebadores específicos basados en el gen fum5 de las principales especies del complejo G.fujikuroi productoras de fumonisinas para su detección por PCR (capítulo 6). Finalmente, se ha analizado la variabilidad y la estructura primaria de la región IGS en las especies del complejo G.fujikuroi que se caracteriza por dos patrones de repeticiones, uno ausente en otras especies de Fusarium y otro consrvado en el género Fusarium que ha podido surgir de una duplicación (capítulo 7)