Estudio de delecciones en el carcinoma pulmonar no microcítico

Resumen

El material de trabajo fueron tejidos incluidos en parafina obtenidos a partir de 30 piezas quirúrgicas de pulmones con carcinoma pulmonar no microcítico procedentes de enfermos del Hospital Clínico de Madrid. También se incluyeron 20 citologías procedentes de cepillados bronquiales de pacientes sin evidencia de malignidad. Los criterios de selección era la presencia de células bronquiales e inflamatorias y un seguimiento de estos pacientes de al menos cinco años sin evidencia de malignidad. Se realizó la microdisección de poblaciones celulares de linfocitos y de células tumorales o peritumorales procedentes de tejidos incluidos en parafina y teñidas con hematoxilina-eosina. También se realizó la microdisección de las células bronquiales e inflamatorias procedentes de citologías benignas fueron teñidas con la técnica de Papanicolaou. Posteriormente se realizó la extracción del ADN de las células microdiseccionadas y la posterior PCR (Reacción en Cadena de la Polimerasa) de las regiones microsatélites:5q21 (D5S346), 3P14.3 (D3S1300), 9P21 (D9S157) y 17p (TP53). El análisis de la perdida de heterocigosidad (LOH) se realizó en el secuenciador automático ABI-PRISM 310 Genetic Analyser de la casa comercial Applied Biosystemas con el software Genescan 2.1. Los resultados obtenidos fueron los siguientes: Las células tumorales mostraron LOH en un 72% de los casos informativos en 5q21 (APC). 47% en 3p21 48% en 9p21 (p16) 33% en 17p13 (p53) De los 30 casos utilizados se encontraron delecciones alélicas en células tumorales en 24 (80%) de ellos: 9 afectaba únicamente a uno de los locus, 10 casos con delecciones en dos regiones cromosómicas, 4 casos con tres loci incluidos y uno con LOH en todas las regiones cromosómicas analizadas. En el análisis de la mucosa peritrumoral de las células bronauiales adyacentes al tumor se encontraron delecciones en un número significativo de los casos: 37,