Receptores de nucleótidos en neuronas granulares de cerebelo de ratatipos y señalizaciones

Abstract

Esta Tesis Doctoral se ha centrado en la identificación funcional de los de receptores de nucleótidos tanto metabotrópicos (P2Y), como ionotrópicos (P2X) en las células y terminaciones sinápticas de cerebelo. Las terminaciones presinápticas de cerebelo son mayoritariamente glutamatérgicas, aunque aproximadamente un tercio de las mismas tienen un potencial neurotransmisor gabaérgico. Se ha detectado la expresión de las subunidades P2X3y de manera más abundante la P2X7.Estas subunidades conforman receptores funcionales en los sinaptosomas de cerebelo, como 10muestran las respuestas a a,beta meATP y la desensibi1izaciónque muestra el receptor P2X3, y el efecto potenciador del magnesio y el del antagonista Brilliant B1ueG sobre el receptor P2X7. En las terminaciones presinápticas existen además receptores específicos de dinucleótidos que responden al ApsA, aunque parte de dichas respuestas están mediadas por receptores P2X de nucleótidos. Se ha determinado además la presencia de receptores P2Y presinápticos (P2Y12/13)cuyomecanismo de señalización se basa en la inhibición de la adeni1ato ciclasa. El estudio de los receptores de nucleótidos se extendió a un modelo celular con cultivos de células granu1aresde cerebelo, dónde se puso de manifiesto la diversidad de los receptores presentes, así como la expresión diferencial de los mismos a 10largo de los días en cultivo. Las neuronas, cuya naturaleza glutamatérgica se confirmo por inmunocitoquímica, presentan receptores P2Y sensibles a nucleótidos de adenina (P2Yl y P2Y13), así como los que responden a nucleótidos de uraci10P2Y4 y P2Y6. La presencia de los mismos se ha confirmado mediante análisis del RNAm. Estos receptores presentan un incremento en su expresión con el desarrollo de las neuronas, excepto el P2Y4, que se expresa en menor medida en los estadíos avanzados de desarrollo. En las neuronas también se expresan receptores P2X, cuya di