Estudio de las vías de señalización mediadas por fas en fibroblastos sinoviales de pacientes con artritis reumatoide

Resumen

INTRODUCCIÓN La hiperplasia de sinoviocitos tipo fibroblasto (FS) contribuye a la inflamación y destrucción articular en la artritis reumatoide (AR). La proteína FLIP frena la apoptosis y podría favorecer la hiperplasia aumentando la resistencia de los FS a ligandos de muerte como TNF y Fas-L, presentes en la sinovial reumatoide. Además la activación de Fas puede favorecer la inflamación participando FLIP. HIPÓTESIS Fas activa una respuesta celular modulada por FLIP, que inhibe la apoptosis y favorece la inflamación. MÉTODOS Se estudió la expresión del FLIP por inmunohistoquímica y western blot en tejidos y cultivos de FS de artrosis (OA) y AR. Tras activar Fas con un anticuerpo agonista se cuantificó la apoptosis midiendo la liberación de nucleosomas mediante ELISA y la activación de AP-1 y NF-kB mediante retardo electroforético, analizando el efecto de la inhibición específica de FLIP o de caspasas. Se analizó mediante RT-OCR la inducción de MMP-1,9,13, MCP-1, IL-8 y lkB, y la quimiotaxis inducida por el medio de cultivo condicionado tras activar Fas. RESULTADOS FLIP se expresó similarmente en cultivos de FS y sinovial de OA y AR, aumentado o disminuyendo con TNF o inhibidores de la síntesis protéica paralelamente a la resistencia a la apoptosis tras activar Fas, que también indujo, AP-1 y NF-kB dependiente de caspasas, aumentando MMP-1, 9, 13, MCP-1, IL-8, e lkB. El medio condicionado tras activar Fas favoreció la quimiotaxis de monocitos. La inhibición específica de FLIP aumentó la apoptosis y redujo la activación de NF-kB. CONCLUSIONES La susceptibilidad ala apoptosis es similar en FS a AR y OA tras estimular Fas. Este puede favorecer el fenotipo activado del FS induciendo NF-kB, AP-1 y sus genes diana. Las respuesta inflamatoria en FS disminuye y la apoptosis aumenta tras la inhibición específica de FLIP, que podría ser una diana terapéutica en la AR. PALABRAS CLAVE Apoptosis