Desulfuración de dibenzotiofeno con pseudomonas putida cect5279

Resumen

El objeto del presente trabajo es el estudio de la biodesulfuración de dibenzotiofeno (DBT) empleando Pseudomonas putida CEC5279 como biocatalizador del proceso. El DBT ha sido elegido como compuesto modelo representativo de los compuestos azufrados que quedan tras cierta desulfuración, por hidrodesulfuración (HDS), en las fracciones petrolíferas, como el gas-óleo. El estudio se realizará en fase acuosa con DBT disuelto en el medio, sin considerar la presencia de una fase orgánica, problema que se aborda en otros trabajos paralelos. La forma de operación elegida es conocida como resting cells; se trata de células vivas en estado latente en las que se les ha detenido el crecimiento en un punto concreto, mediante la eliminación de los nutrieres del medio de cultivo, por lo que el proceso comprende dos etapas: la de crecimiento, durante la cual se obtienen células bacterianas con capacidad desulfurante y la de desulfuración. Antes de abordar cualquiera de las partes del estudio, ha sido preciso establecer un protocolo de trabajo estándar, que garantice la repetitividad de los resultados, para poder, de esta forma, analizar y comparar los resultados obtenidos en los diferentes experimentos. Con este fin se realizarán una serie de estudios preliminares centrados fundamentalmente en la obtención del inóculo y en el mantenimiento de la viabilidad celular, para establecer procedimientos experimentales específicos parala conservación del microorganismo, y para el estudio de las etapas de crecimiento y biodesulfuración de DBT. Así mismo, es necesario el desarrollo de métodos analíticos que permitan conocer la evolución del sistema, para cuantificar el crecimiento bacteriano, el consumo de sustratos (fuente de carbono, fuente de nitrógeno y oxígeno disuelto), así como la capacidad desuflurante desarrollada durante le mismo y que luego se aplicará en la etapa de BDS. En cuanto a la producción del biocatalizador, el estudio se centrará en los facto