Avances en el diagnóstico molecular de aspergilosis. Posibilidad de tipificación de cepas de aspergillus fumigatus aisladas de diferentes orígenes

Resumen

INTRODUCCIÓN A.fumigatus es un hongo haploide y eucariota que se reproduce de forma asexual. Resiste a gran variedad de temperaturas y climas, pudiendo aislarse del aire, del suelo, y del agua. Forma parte de la flora saprofita del hombre y de los animales. La actividad elastasa es un importante factor de virulencia de A.fumigatus y puede relacionarse con la patogenicidad del mismo mediante el Índice de Actividad Elastasa (IAE). Por tanto, A.fumigatus puede comportarse como un agente patógeno causando aspergilosis en los hombres y en los animales. Las aspergilosis en medicina humana afecta sobretodo a personas inmunosuprimidas y es una enfermedad muy importante, cada vez más frecuente y con elevado índice de mortalidad. En medicina veterinaria existen gran número de especies animales que pueden afectarse de aspergilosis aunque en nuestro estudio nos centramos en la mastitis aspergilar y en la aspergilosis canina. Existen diferentes tipos de diagnosticó de aspergilosis: clínico, por imagen, microbiológico, histopatológico, inmunológico y molecular. OBJETIVOS Poner a punto una técnica PCR para amplificiar ADN genómico de A.Fumigatus y detectar la sensibilidad y la especificidad de la misma. Aplicar esta téncia PCR a sueros a de oveja y perro sospechosos de sufrir aspergilosis y comparar los resultados obtenidos con aquellos obtenidos anteriormente métodos inmunológicos. Tipificación genotípica de cepas de A.fumigatus con diferente origen e IAE, intentando relacionar los genotipos obtenidos con el IAE, intentando relacionar los genotipos obtenidos con el IAE y su origen. Cálculo de la Concentración Mínima Inhibitoria (CMI) de diversos antigúngicos frente a estas cepas para comparar las diferentes actividades de los mismos y comprobar si existe relación relación entre la CMI obtenida y el IAE, así como entre la CMI y el origen de los aislados. MATERIAL Y MÉTODOS Se emplearon varios métodos de obtenci