Nuevas alternativas terapéuticas mediante utilización de péptidos antibióticos de origen eucariótico en infecciones producidas por leishmania

Resumen

En el presente trabajo se ha estudiado la acción leishmanicida de un conjunto de péptidos que incluyen análogos sintéticos de cecropina A-melitina, así como cinco análogos de péptidos antibióticos de anfibios bajo tres modelos, sobre parásitos aislados, en macrófagos infectados y en macrófagos genéticamente modificados para la producción endógena de los mismos. Se determinó el mecanismo de acción de aquellos con alta actividad leishmanicida sobre promastigotes y amastigotes de Leishmania, que resultaron ser todos con la excepción de buforina. El proceso letal se basó en la permeabilización de membrana del patógeno mediante interacción estequiométrica péptido-fosfolípido. Todos resultador activos a una concentración micromolar. El análogo de cecropina CA(1-8)M(1-18) resultó el más potente y fue elegido par estudios posteriores. La importancia de su estructuración en alfa hélice de dicho péptido se determinó por comparación de su actividad con la de diferentes diastereómeros sintéticos obtenidos del mismo por incoroporación de su actividad con la de diferentes diastereómeros sintéticos obtenidos del mismo por incorporación de aminoácidos D. Los péptidos activos en membrana inducen la expresión de NOS2 en macrófagos murinos, dicho mecanismo es parcialmente responsable de la eliminación de amastigotes en células infectadas. La inducción de NOS2 requiere el concurso de las vias NF-kB y AP-1, cuya activación está relacionada con la permeabilización de la membrana del macrófago, salida de ATP intracelular y activación de receptores purinérgicos, esencialmente el P2X7. Los macrófagos modificados genéticamente para la expresión de NHP-1 o CA(1-8)M(1-18) redujeron la carga parasitaria en un 50% por mecanismos diferentes a la inducción de NOS2, sirviendo como etapa previa a una terapia génica contra Leishmania basada en estos péptidos.