Nanocompactación coloidal del ADNlipoplejos y surfoplejos

Resumen

En los últimos años se está impulsando, desde muchos ámbitos científicos, el florecimiento de una nueva modalidad médica capaz de reducir o aliviar los síntomas de determinadas enfermedades a nivel molecular: la terapia génica. Sin embargo, la terapia génica aún se encuentra en una fase temprana, como consecuencia de la complejidad que existe en el transporte y protección del ADN. La Química Coloidal y Supramolecular juega un papel fundamental en el avance de la terapia génica, al aportar complejos coloidales liposoma-ADN y micela-ADN, de especial importancia por su capacidad de transportar, compactar y proteger segmentos de ADN hasta su llegada a la célula diana. Esta Tesis pretende ayudar a comprender y a esclarecer, desde un punto de vi sta físico-químico, el comportamiento de estos complejos liposoma-ADN y micela-ADN, denominados respectivamente lipoplejos y surfoplejos, aportando para ello información fisicoquímica de precisión relativa a la formación y a las estructuras de estos complejos coloidales. Para ello, se han estudiado y caracterizado cuatro liposomas mixtos, constituidos por un tensioactivo catiónico y un fosfolípido zwitteriónico en relación 1:1. Se han escogido tres tensioactivos catiónicos sintéticos con características estructurales distintas: i) el cloruro de 1,2-diestearoil-3-trimetilamonio propano (DSTAP); ii) el bromuro de dioctadecil-dimetilamonio (DODAB); y iii) cloruro de 3-?-[N-(N¿,N¿-dimetilaminoetano)-carbamoil]-colesterol (DC-Chol). Asimismo, s e han elegido dos fosfolípidos zwitteriónicos coadyuvantes en la etapa de transporte e inserción en la célula diana, ambos de origen natural y con carga neta nula a pH fisiológico: i) la 1,2-dioleoil-sn-glicero-3-fosfoetanolamina (DOPE); y ii) la 1,2 -dilauroil-sn-glicero-3-fosfocolina (DLPC). Con el fin de estudiar el efecto del grupo polar y/o la región hidrofóbica del tensioactivo catiónico, así como la substitución del fosfolípido coadyuvante, se han estudiado los siguientes liposomas catióni cos mixtos: DSTAP/DOPE, DODAB/DOPE, DODAB/DLPC y DC-Chol/DOPE, todos ellos en relación 1:1. Se ha realizado, también, la caracterización físico-química del sistema micelar formado por el tensioactivo catiónico bromuro de octadecil-trimetilamonio (C18 TAB). La mezcla de liposomas catiónicos mixtos o micelas catiónicas con ADN ha constituido cuatro lipoplejos (DSTAP/DOPE¿ADN, DODAB/DOPE¿ADN, DODAB/DLPC¿ADN y DC-Chol/DOPE¿ADN) y un surfoplejo (C18TAB¿ADN). Es destacable que la Tesis que se...