Nuevas aportaciones al diagnóstico de las enfermedades víricas de la abeja apis mellifera y su aplicación al estudio epidemiológico

Resumen

Debido a la creciente desaparición que vienen sufriendo las poblaciones de Apis mellifera, fenómeno denominado síndrome de despoblamiento de las colmenas (SDC), desde hace unos años se han iniciado diversas líneas de investigación orientadas a profundizar en el conocimiento de las patologías que afectan a las abejas melíferas. En general, y más concretamente en relación a las enfermedades virales, la información acerca de dichas patologías es todavía escasa debido a la falta de métodos de diagnóstico adecuados, específicos y sensibles, surgiendo así la necesidad de establecer nuevos métodos de diagnóstico virales y mediante ellos, desarrollar estudios de prevalencias y distribución geográfica para poder analizar el estatus sanitario de dichas abejas y tratar de buscar soluciones al problema. Por ello, y en el marco de dos proyectos de investigación (API06-005. COORD-2; RTA2005-00164-C02-02), se han desarrollado y adaptado diversos métodos de diagnóstico molecular los cuales han sido empleados para el análisis de las muestras disponibles. Se realizaron además estudios enfocados a conocer la presencia de virus en las colmenas españolas y sus posibles vías de difusión. Para ello, se desarrollaron por primera vez técnicas de RT-PC R en tiempo real basadas en SYBR Green (SG) para la detección del virus de realera negra (BQCV), el virus de alas deformadas (DWV) y el virus de la cría sacciforme (SBV). Además, se adaptaron a tiempo real basada en SG, desde RT-PCR convencionales, las técnicas para detección del virus de la parálisis aguda (APBV), el virus Kashmir (KBV), el virus de la parálisis crónica (CBPV) y el virus israelita de la parálisis aguda (IAPV). Todas ellas se optimizaron y validaron determinando sus límites de sensibilidad y especificidad. Además, debido a las características de la RT-PCR en tiempo real, se desarrollaron curvas estándar para poder llevar a cabo la cuantificación de carga viral en las muestras analizadas. Una vez analizadas las muestras disponibles, se hizo un estudio epidemiológico sobre la distribución en España de las virosis mencionadas obteniendo como resultado la prevalencia de DWV (79 ), BQCV (70.8 ), CBPV (11.6 ), KBV (4 ), SBV (0.8 ), ABPV (0 ) e IAPV (0.2 ). Estos datos permiten establecer un conocimiento inicial del estatus sanitario de las colmenas respecto a los virus que les afectan. Además, tras el ajuste del número de colmenas por región al número de muestras totales recogidas por región y mediante modelos...