Análisis de los homólogos nucleares de mfp1 en a.cepacaracterización, presencia en distintos tipos celulares y posible funcionalidad

Resumen

En esta Tesis Doctoral se caracterizan las dos proteínas MFP1 (MAR-blinding Filament-like Proteín 1) nucleares de Allum cepa mediante inmunodetección e inmunoprecipitación con dos sueros desarrollados contra las proteínas de tomate y Arabidopsis. AcMFP1-78KDa es una proteína constitutiva con un pl ligeramente ácido (5,5), y se distribuye en distintos subdominios nucleares en función del tipo celular y el tejido. Mediante microscopía electrónica se ha demostrado que lo hace en pequeños dominios localizados preferentemente en la periferia de las masas de heterocromatina densa. Posee además una doble localización subcelular, localizados en los cloroplastos con un patrón de distribución similar al de MFP1 en otras especies. El segundo homólogo, de 90 Kda y al básico (8,5-9,5), posee distintos estados de fosforilación que influyen en su unión a la matriz nuclear, habiéndose demostrado que la Caseína kinasa CK2 endógena puede regular dicha unión. AcMFP1-90KDa se acumula en cuerpos nucleares cuyo número se incrementa por la proliferación celular y la presencia de luz. También se distribuye por el retículo de la matriz nuclear, asociada a los filamentos del nucleoesqueleto. Estudios de co-localización demuestran que las proteínas AcMFP1 no forman parte de los complejos de replicación, los de procesamiento co-transcripcional, los gránulos intercromatínicos ni los Cuerpos de Cajal. Las distintas características y patrones de distribución y expresión de ambas proteínas sugieren funciones diferentes, o al menos distintas formas de regulación. Los resultados sugieren una interacción de AcMFP1-78KDa con la eucromatina, y una función estructural en la matriz nuclear para AcMFP1-90KDa.