Evaluación y criopreservación de espermatozoides como herramienta para la conservación de felinos amenazadosaplicación en el caso del lince ibérico (Lynx pardinus)

Resumen

l lince ibérico (Lynx pardinus) es el felino más amenazado del mundo y es la única especie de la familia Felidae considerada en peligro crítico (IUCN 2008). Sus poblaciones han alcanzado tamaños tan reducidos que su viabilidad está amenazada, lo cual unido a los bajos niveles de variabilidad genética hacen a estas poblaciones muy vulnerables frente a la acción conjunta de factores ambientales y demográficos. En una situación como ésta es necesario llevar a cabo medidas complementarias de conservación in-situ y ex-situ, entre ellas la cría en cautividad, el desarrollo de bancos de recursos biológicos y el uso de técnicas de reproducción asistida (ARTs). En 2003 se puso en funcionamiento el programa de Cría en Cautividad del Lince Ibérico y e l Banco de Germoplasma y Tejidos de Especies Silvestres (BanGES) y se iniciaron líneas de investigación para el desarrollo de ARTs de aplicación al lince ibérico. La investigación desarrollada ha incluido la recogida de material reproductivo (especialmente espermatozoides) y somático, la caracterización de parámetros reproductivos y la criopreservación espermática en la propia especie y la realización de experimentos de criopreservación espermática en especies utilizadas como modelo, el gato doméstico (Felis catus) y el lince rojo (Lynx rufus). En un primer estudio se han evaluado algunos factores del proceso de criopreservación espermática con espermatozoides epididimarios de gato doméstico. Se ha examinado la eficacia de la criopreservac ión analizando la motilidad (mediante el uso de un índice de motilidad espermática, SMI) y la integridad acrosómica ( IA) antes y después de la congelación empleando (a) 2 diluyentes: TEST y Biladyl, (b) 2 tasas de refrigeración: rápida en 30 min (-0 ,5 C/min) y lenta en 120 minutos (-0,125 C), (c) 2 sistemas de añadido del glicerol: en 1 vez y en 3 etapas, (d) 2 sistemas de almacenamiento: píldoras sobre hielo seco (CO2 sólido) y pajuelas sobre vapores de nitrógeno, (e) 2 sistemas de rellenado d e las pajuelas: a temperatura ambiente antes de la refrigeración y a 5 C después de la misma, y (f) 2 sistemas de congelación de pajuelas con 2 tasas de congelación: en 1 y 2 niveles sobre vapores de nitrógeno. Además, se ha evaluado la capacidad fecundante in vitro de los espermatozoides criopreservados, incluyendo un análisis de la eficacia de 2 métodos de estimulación de la motilidad (el "swim-up" y el añadido de pentoxifilina), sobre la tasa de fecundación in vitro. Se encontraron resultados...