Utilidad diagnóstica y vacunal de las proteínas recombinantes rncgra7 y rncsag4 de neospora caninum

Resumen

Neospora caninum es un parásito intracelular formador de quistes considerado como una de las principales causas de aborto en el ganado bovino en todo el mundo y causa de un grave impacto económico en las explotaciones afectadas. Los principales retos en la investigación sobre este parásito son, por un lado, la mejora de las herramientas para el diagnóstico de la infección y de la enfermedad que permitan seleccionar y aplicar las medidas de control más eficaces en cada caso, y, por otro lado, el desarrollo de una vacuna eficaz, segura y económicamente viable frente al aborto y la transmisión de N. caninum. Las herramientas de diagnóstico serológico así como las vacunas basadas en proteínas recombinantes han suscitado un gran interés en los últimos años por su potencial para cubrir las demandas actuales en el diagnóstico y el control de la neosporosis y por la facilidad de producción industrial, reducción de costes, homogeneidad entre lotes y estabilidad de las mismas. Las proteínas NcG RA7 y NcSAG4 son dos candidatas ideales para el desarrollo de estas herramientas ya que, la primera, es una proteína muy inmunógena, asociada a la multiplicación activa de los taquizoítos y cuya posible utilidad diagnóstica y vacunal ya había sido su gerida con anterioridad, mientras que la segunda, es una proteína antigénica expresada de forma específica y temprana en los bradizoítos y, por tanto, asociada a la fase de persistencia de la infección en el hospedador. En la primera parte del estudio (Capítulo II) se caracterizaron en profundidad ambas proteínas en cuanto a su inmunolocalización, por un lado, y en cuanto a su función en el proceso de invasión celular por parte de los taquizoítos en cultivo celular, por otro. Estos ensayos se l levaron a cabo mediante el empleo de anticuerpos monoclonales frente a cada una de las proteínas recombinantes garantizando una mayor especificidad. Nuestro resultados confirmaron que NcGRA7 se expresa en ambos estadios, taquizoíto y bradizoíto, y que se secreta al exterior del taquizoíto y a la matriz de las vacuolas parasitóforas tanto de las que contienen taquizoítos como de las que contienen bradizoítos. Además, NcGRA7 parece estar implicada, al menos parcialmente, en la invasión de la célula hospedadora por el taquizoíto. Por otro lado, se confirmó la expresión superficial y específica de NcSAG4 en los bradizoítos (y en los taquizoítos que expresan de forma transgénica dicha proteína). Aunque esta proteína no parece estar involucrada...