Reparación de lesiones del cartílago articular mediante compuestos transportador -BMP-células

Resumen

Los objetivos concretos del proyecto se centran en: La evaluación y comparación del uso de las diferentes rhBMP (2,4) por separado, combinadas y junto con células en el proceso reparativo condral. Evaluar el comportamiento de los diferentes biomateriales empleados desarrollados en el Instituto de Estudios Biofuncionales y empleados como transportadores en comparación con los usados mas frecuentemente en la investigación. Metodología: Desarrollo y caracterización de los compuestos. Comprobación in vivo del potencial reparativo de los diferentes compuestos transportador-BMP y transportador-BMP-células. Modelo experimental: lesión condral y osteocondral en cóndilo femoral de conejo de raza neozelandesa. Estudio de las piezas mediante microscopía óptica, histoquímica y microscopía electrónica en el Servicio de Anatomía Patológica del Hospital Clínico San Carlos. Selección la densidad celular más adecuada para formar el compuesto final que combine los diferentes elementos implicados en el proceso reparativo. Ello implica una mayor complejidad en el estudio dadas las múltiples posibilidades existentes tanto en origen como en grado de diferenciación. Con respecto a la elaboración de diferentes tipos de transportadores para su uso en regeneración de tejido cartilaginoso, estos materiales se han desarrollado en el Instituto de Estudios Biofuncionales. Los compuestos derivados de quitosano y alginato se han obtenido y caracterizado, tanto a nivel fisicoquímico como de biocompatibilidad. Para la evaluación y comparación del uso de las diferentes rhBMP por separado y en conjunción en el proceso reparativo condral, el primer paso a sido la obtención de las proteínas recombinantes necesarias. En este sentido, se ha procedido a la producción, purificación, plegamiento in vitro y obtención de rhBMP-2 Y rhBMP-4. También se realizó la caracterización de su actividad biológica mediante ensayos colorimétricos sobre la linea celular C2C12. Con respecto a la evaluación in vivo d e los diferentes tipos de transportadores desrrollados, se ha realizado la experimentación animal prevista en la Unidad de Cirugía Experimental del Hospital Clínico San Carlos. Se han operado 10 series de 6 conejos cada una. A cada conejo se le real izó un defecto en el condilo femoral de ambas patas traseras, obteniendo 120 piezas. Con respecto al análisis histológico de las piezas obtenidas, se obtuvieron 10 cortes reriados en el defecto de cada pieza y se realizaron por duplicado las siguientes...