Técnicas moleculares aplicadas en la búsqueda de las fuentes de infección causantes de brotes de legionelosis

Resumo

El objetivo primordial de este estudio se relaciona con la tarea sanitaria encomendada a los Laboratorios de Salud Pública, en cuanto a la vigilancia y control de la enfermedades infecciosas. Actividades de caracterizavción o tipificación de proveen una información de gran utilidad para las autoridades sanitarias a la hora de enfrentarse a la prevención y el control de las enfermedades infecciosas. En este trabajo, la finalidad a la hora de atender esta tarea sanitaria, es doble, por un lado, la comparación de los aislados de enfermos no relacionados entre si, permite un conocimiento preciso de las cepas de Legionella que causan infección y por otro lado, la comparación de aislados de enfermos con aislados recuperados de las supuestas fuentes de infección, permite establecer su posible relación epidemiológica. Esta tesis pretende analizar varias técnicas disponibles para estos dos fines. Se seleccionaron dos grupos de cepas: uno de L.pneumophila SG1 procedentes de enfermos no relacionados, y otro formado por parejas o grupos aislados clínico/ambiental, es decir de aquellos episodios infecciosos en que dispusimos al menos de un aislado de origen clínico y otro de origen ambiental. En este estudio se aplicaron cuatro técnicas: la primera fue la utilización de anticuerpos monoclonales por ser la técnica más accesible. La segunda fue AFLP (Amplified Fragments Length Polymorphism) por ser una técnica estandarizada en varios laboratorios europeos con la intención de intercambiar perfiles en lugar de cepas; La tercera fue la electroforesis en campo pulsante (PFGE) por ser una técnica que en los últimos años están teniendo una gran aceptación como método de tipificacón para una gran variedad de especies bacterianas, entre las que se encuentra Legionella; y la cuarta fue la secuenciación de varios genes (SBT), por ser una técnica prometedora en cuanto a la facilidad en la interpretación de los resultados.