Variaciones en la expresión de moléculas de adhesión y otros parámetros inflamatorios en el asma bronquialestudio realizado mediante análisis fluorocitométrico

Resumen

El asma bronquial se define como una enfermedad inflamatoria crónica. En los últimos años la inducción de esputo, y su posterior análisis, ha llegado a ser una herramienta muy útil para el estudio de la inflamación bronquial en pacientes asmáticos. La citometría de flujo permite la separación y cuantificación de diferentes líneas celulares, si bien, su aplicación para el análisis de esputo, no está exenta de problemas metodológicos. Con este trabajo, pretendimos valorar si el análisis del esputo inducido, mediante el empleo de citometría de flujo, es una técnica utilizable en el examen de la inflamación en el asma bronquial, capaz de identificar la presencia de células inflamatorias activadas en la mucosa, incluso en pacientes con asma leve y estable clínicamente. Además, se objetivaron mayores concentraciones de ECP e IgE total en el esputo del grupo de asmáticos. Métodos: Se indujo esputo mediante la inhalación de suero salino hipertónico en sujetos sanos y asmáticos. Las muestras se procesaron con ditiotreitol (DTT 3µM), un agente mucolítico necesario para obtener la dispersión celular. Las células se marcaron con anticuerpos monoclonales para su análisis en un citómetro de tres colores. Los niveles de IgE total y ECP se midieron en suero y la fase fluida del esputo. Resultados: La celularidad del esputo en los pacientes asmáticos presentaba un aumento de eosinófilos (media del 26.3 ) frente a los sujetos controles, pero sin diferencias significativas en el número de linfocitos. Sin embargo, los linfocitos en los pacientes asmáticos mostraban una expresión de marcadores de activación en su superficie elevada (CD23 en células B y CD25 en células T). Sorprendentemente, no se observaron diferencias significativas en la expresión de moléculas de adhesión. Conclusiones: el análisis fluorocitométrico del esputo inducido puede convertirse en una técnica muy útil para examinar las células que intervienen en el proceso inflamatorio del asma bronquial incluso en sujetos no fumadores y en pacientes con asma leve y clínicamente estables. Es una técnica sencilla y segura, si bien requiere contar con personal entrenado en la inducción de la muestra y la interpretación de resultados obtenidos mediante citometría. Aporta in formación complementaria sobre el estado de activación celular, si bien se necesitan nuevos estudios que desarrollen las utilidades de la técnica, amplíen las líneas celulares investigadas y solucionen posibles problemas metodológicos.