Estudio de las mutaciones del gen fancc y fanca en pacientes españoles con anemia de fanconi

Resumen

INTRODUCCIÓN La anemia de Fanconi (AF), es una enfermedad congénita transmitida por herencia autosómica recesiva, caracterizada por múltiples anomalías músculo-esqueléticas y cutáneas, fracaso de la médula ósea y predisposición del cáncer. El diagnóstico estándar se basa en el incremento de la fragilidad cromosómica espontánea de las células de estos enfermos ante la presencia de agentes alquilantes como la mitomicina C o diepoxibutano. En los últimos años se han identificado 8 subtipos genéticos (FAA-FAH). El primer gen secuenciado fue el gen FANCC, el subtipo genético FA-C engloba un 12-15% del total de los enfermos con AF, siendo las mutaciones más frecuentes de este gen la IVS4+4 A>T y 322 del G (84%). El segundo gen que se secuenció fue el gen FANCA, el subtipo genético FA-A es el más frecuente y engloba en torno a un 60-66% de los pacientes con AF y presenta una amplia variabilidad en cuanto a las mutaciones encontradas, hasta más de 70 mutaciones descritas. OBJETIVO Introducción de técnicas de Biología Molecular para el estudio de las mutaciones más frecuentes de los genes FANCC y FANCA de los pacientes españoles con AF. MATERIAL DNA genómico extraído de sangre periférica de 21 pacientes diagnosticados de AF mediante características clínico/hematológicas y test de fragilidad cromosómica inducida positivo (5 de los cuales tenían alta sospecha diagnóstica con test cromosómico no concluyentes). MÉTODOS Para el estudio de las mutaciones IVS4+4-T y 322delG del gen FANCC se utilizó la técnica PCR-ARMS (Amplification Refractory Mutation System). Para el estudio del gen FANCA se utilizó la técnica RNA-SSCP (Single Strand Conformation Polymorphism) para el screening de mutaciones de cada exón y en caso de sospecha se realizó secuenciación directa del mismo. RESULTADOS No se ha identificado ninguna de las dos mutaciones estudiadas del gen FANCC en ningún paciente.