Mutagénesis in vitro del antígeno hla-a2localización de los sitios funcionales y papel del carbohidrato

Resumen

Las moléculas codificadas en el complejo principal de histocompatibilidad tienen un papel primordial en el proceso de rechazo de tejidos actuando además como elemento de restricción en la eliminación de células infectadas por virus transformadas químicamente o en estado neoplásico. Utilizando una combinación de técnicas de biología molecular e inmunológicas se han estudiado diversas regiones del antígeno de histocompatibilidad denominado hla-a2 y su importancia en la estructura del polipéptido asociación de la cadena pesada con la ligera y propiedades inmunológicas de la molécula (reconocimiento por anticuerpos monoclonales de la especificidad -a o -b así como por linfocitos citotóxicos aloespecíficos anti-hla-a2. En concreto el papel del único carbohidrato que se encuentra presente en todas las moléculas de hla ha sido analizado mediante cambios en la secuencia canónica de glicosilacion (asn-x-ser). Los resultados sugieren que este carbohidrato no parece ser importante para la expresión en superficie y propiedades antigénicas de la molécula. Sin embargo cambios en la posición 86 (asn) tienen un gran efecto en la asociación con la b2m y posterior expresión en superficie. Una de las regiones mas polimórficas de las moléculas de hla ha sido sistemáticamente substituida por los residuos presentes en la misma posición pero en el antígeno hla-b7. De esta forma se han podido localizar varios epítopos serológicos (ma2.1 pa2.1 ma2.2 bb7.2 y el determinante supertípico -bw6 presente en las moléculas de la serie -b). El panel de mutantes generado ha sido también utilizado para analizar el patrón de reactividad de un panel de clones citolíticos. Los resultados sugieren la enorme diversidad que implica la respuesta alogénica al existir múltiples patrones de reconocimiento por estos ctls.