Desarrollo y embriogénesis del polen de nicotiana tacabumlocalización y expresión in situ de proteínas implicadas en la transducción de señales

Resumen

Los procesos de desarrollo en plantas implican la interacción y regulación coordinada de numerosos factores y rutas fisiológicas en las que intervienen diferentes células y tejidos. Nuestra comprensión de los mecanismos que controlan estos procesos aún es escasa, aunque los datos hasta ahora han revelado que las rutas de transducción y señalización frente a señales extra e intracelulares que dirigen la célula hacia proliferación o diferenciación cumplen un papel fundamental. En esta tesis se ha estudiado, desde el punto de vista celular, el posible papel de algunas de estas proteínas implicadas en la transducción de señales, concretamente de la familia de las MAPA quinasa, en el inicio y progresión de dos programas de desarrollo del grano de polen que conducen a procesos de diferenciación y proliferación completamente diferentes. Como etapas previas al estudio se han desarrollado los cultivos in vitro de microsporas aisladas para reproducir ambos procesos de desarrollo y embriogeénesis del polen, y se ha realizado una caracterización celular y ultraestructural. Se han estudiado dos MAP quinasas aisladas recientemente en tabaco de cuya funcionalidad y actividad se sabe muy poco; la Ntf4 y la Ntf6; y las homólogas de Erk1 y Erk2 en plantas, así como las MAP quinasas en estado activo en general. Los resultados sobre su expresión y localización in situ han revelado que la Ntf4 está implicada en etapas finales de la maduración del grano de polen, posiblemente con un papel en la preparación a la germinación del tubo polínico. Teniendo una localización inicialmente citoplasmática, su entrada al núcleo celular se realiza en una etapa concreta del proceso y está asociada a su activación. Los resultados obtenidos con la Ntf6 indican que esta MAP quinasa tiene una expresión más amplia en células vegetales en proliferación, además del grano de polen en desarrollo. Su localización en elementos subcelulares d