Caracterización funcional de residuos polimórficos del antígeno de histocompatibilidad hla-dp

Resumen

El Complejo Principal de Histocompatibilidad humano (HLA) agrupa a un amplio número de genes que están implicados en la respuesta inmunitaria. En este grupo de genes se incluyen las moléculas de clase II (HLA-DP, DQ y DR), que unen péptidos antigénicos, presentándolos para que sean reconocidos por linfocitos T CD4+. Una de las principales características de las moléculas de clase II es su elevado polimorfismo. La cristalización de las moléculas HLA-DR y HLA-DQ ha supuesto un importante avance para determinar la importancia de polimorfismo en su ficción. Sin embargo, es muy poca la información disponible sobre la implificación de HLA-DP en la respuesta inmune, debido principalmente a la falta de una estructura cristalina y los escasos análisis funcionales realizados en esta molécula. El objetivo de este trabajo ha sido caracterizar el papel del polimorfismo de la cadena beta de HLA-DP en la funcionalidad de esta molécula. Para ello, se generaron, mediante mutagénesis dirigida, alelos mutantes de DPB1*02012 sustituyendo los aminoácidos presentes en las posiciones polimórficas de dicho alelo por los aminoácidos presentes en esas mismas posiciones en otros alelos de HLA-DP. La LCL 45.EM1, una línea celular linfoblastoide B, que expresa niveles normales de mRNA DPA1 pero no es capaz de transcribir DPB1, fue transfectada con el cDNA de DPB1*02012 silvestre o mutado. Estos transfectantes se utilizaron para evaluar la importancia de polimorfismo en la formación de epítopos reconocidos por anticuerpo monoclonales HLA-DP específicos, en la especificidad de unión peptídica de esta molécula y en el reconocimiento mediado por células T. En el presente trabajo, se ha demostrado el papel de cada uno de los residuos de HLA-DP en la funcionalidad de esta molécula, así como su participación concreta en la presentación antigénica y reconocimiento por células T. Además mediante modelización informática se ha obtenido un