Estudio del sistema fosfoproteína fosfatasa del díptero ceratitis capitata

Abstract

El objetivo de esta tesis ha sido el estudio del sistema fosfoproteína fosfatasa en el díptero ceratitis capitata. Se han aislado y purificado dos fosfoproteína fosfatasas que hemos denominado fosfoproteína fosfatasa i y ii del díptero ceratitis capitata. El aislamiento purificación y caracterización posterior fue llevada a cabo utilizando como sustratos las fosfohistonas h1 y h2b, para lo cual fue necesario aislar ambas proteínas de timo de ternera así como la proteína quinasadependiente de camp y fosforilar ambas histonas. Se llevo a cabo un estudio de la influencia de la fuerza iónica y de la dependencia de cationes divalentes tales como el mn elevado a 2+, mg elevado a 2+ y ca elevado a 2+. Se determinaron los inhibidores de fosfoproteína fosfatasa: floruro, pirofosfato, cobalto y zinc. Asimismo se determino la influencia de los nucleótidos de adenina atp, adp y amp e y el mecanismo de acción del atp conjuntamente con manganeso y magnesio. La caracterización estructural y cinética incluyo la determinación del ph optimo, la estabilidad frente a la temperatura, la energía de activación y la km de ambas enzimas para ambos sustratos. Por ultimo se determinaron los pesos moleculares de ambas enzimas en sephadex g-200 y en electroforesis en gel de poliacrilamida con sds. La experimentación expuesta con anterioridad ha permitido clasificar ambas fosfoproteína fosfatasas de acuerdo con la clasificación propuesta por cohen.