Estudio de los efectos del cultivo y la congelación en la viabilidad de embriones ovinos en estadios previos a la compactación

Abstract

Los sistemas basados en la producción y conservación in vitro de embriones son ampliamente utilizados hoy en día, a pesar de que sus rendimientos son aún bajos. Una solución para aumentar la eficacia reproductiva utilizando estos procedimientos, sería la congelación de embriones en estadios tempranos, ya que se evitarían las posibles pérdidas asociadas al cultivo; si bien esta es una técnica imprescindible en los sistemas de producción in vitro. Por ello, en este trabajo, hemos definido las condiciones óptimas para llevar a cabo el cocultivo de embriones en estadios comprendidos entre 2 y 12 células, con monocapas de células epiteliales de oviducto, mediante la evaluación del efecto de la edad de la monocapa y de la conservación por congelación de las células somáticas. Así mismo, hemos estudiado las pérdidas de supervivencia a la congelación que se provocan por el cultivo prolongado, y el rendimiento de la congelación de embirones en etapas iniciales, o por el contrario es más adecuado cultivar los embriones hasta el estadio de blastocito antes de ser congelados. Finalmente, puesto que la concentración de sacarosa más utilizada en la retirada del crioprotector, en la congelación clásica, puede ser un factor de influencia en la supervivencia de distintos estadios, ya que la permeabilidad de los embriones varía a lo largo del desarrollo preimplantacional, hemos analizado el efecto de dos concentraciones distintas de esta macromolécula. El análisis estadístico de nuestros resultados ha puesto de manifiesto que la edad de la monocapa no influye sobre el desarrollo de embriones en estadios iniciales, ni tampoco la congelación de las células ejerce influencia sobre la tasa de blastociotos. Los resultados de desarrollo hasta blastocitos registrados permiten afirmar que las monocapas de células congelados, sembradas dos días antes del inicio del cultivo, posibilitan la homogoneización del sistema, proporciona