Inmovilización y estabilización de tripsina. Su uso en síntesis de enlaces peptídicos

Résumé

La utilización de proteasas como catalizadores de síntesis de enlaces peptídicos presenta un enorme interés práctico: las reacciones tienen lugar en condiciones suaves, no hay riesgo de racemización, la síntesis es altamente especifica... Sin embargo una serie de problemas importantes (reutilización de los enzimas, actividad y estabilidad de los mismos en condiciones de síntesis...) dificultan su masiva introducción en la industria. El objetivo principal de este trabajo es la evaluación y optimización de las posibilidades de utilización del enzima tripsina como catalizador de síntesis de enlaces peptídicos. Para ello nos planteamos tres objetivos principales: preparación de derivados de tripsina muy activos y estables mediante el desarrollo de una nueva estrategia de estabilización de enzimas- por enlace covalente multipuntual enzima (amino)-agarosa (aldehído). Optimización de dos estrategias diferentes de síntesis de enlaces peptídicos en sistemas monofásicos (cinética o termodinámicamente controladas) catalizadas por nuestros mejores derivados. Comparación global e integrada de las dos estrategias de síntesis estudiadas. Evaluación conjunta de: rendimientos de síntesis, actividad y estabilidad del catalizador; diseño de los reactores de síntesis.