Estudio de la respuesta inmune en la leishmaniasis canina asintomática

Resumen

La leishmaniasis visceral canina es un problema veterinario y de salud pública en áreas endémicas. Además, diferentes autores han sugerido que el perro es un buen modelo para investigar la patogénesis de la leishmaniasis visceral humana. El perro es el reservorio natural de L infantum, por lo que el estudio de su sistema inmune puede favorecer el desarrollo de nuevos programas profilácticos y terapéuticos, pues todavía hoy es bastante desconocido. Las citoquinas son importantes moléculas reguladoras del sistema inmune con capacidad efectora en el mismo. En el modelo murino de leishmaniasis se ha establecido que según las citoquinas producidas por las células T, se determina la susceptibilidad o resistencia al desarrollo de la enfermedad de forma que citoquinas de TH1 se asocian con resistencia (TNF-alfa, IL-2, INF-y, IL-12, IL-18) y las de respuestas TH2 con susceptibilidad (IL-4, IL-6 e IL-10). En el presente trabajo se describe la estandarización de una técnica de RT-PCR semicuantitativa como sistema de detección y cuantificación de la expresión de citoquinas (TNF-alfa, IL-2, INF-y, IL-18, IL-4, IL-6 e IL-10) en relación con la expresión de GAPDH, en PBMC procedentes de perros sanos, asintomáticos y enfermos. El estudio fue realizado en PBMC analizadas ex vivo, y en PBMC cultivadas sin estímulo, en presencia de un mitógeno inespecífico (ConA) y estimuladas por los antígenos solubles de Leishmania (LSA). La expresión de citoquinas en PBMC de perros sanos se corresponde con un fenotipo TH0, tanto ex vivo como in vitro. La leishmaniasis canina asintomática está caracterizada por una expresión de citoquinas que favorece el desarrollo de respuesta inmune celular protectora caracterizada por: (i) la ausencia de expresión de IL-4 en aislados de PBMC analizados ex vivo. (ii) expresión de todas las citoquinas estudiadas como consecuencia de la estimulación inespecífica (ConA), es decir, fenotipo mezcla de TH