Mecanismos implicados en la reparación de las lesiones inducidas en pbr322 por tratamiento puva (8-metoxipsoraleno + luz ultravioleta a)

Resumen

En este trabajo se han estudiado los efectos genotóxicos derivados de una agresión directa al dna de pbr322 con 8-mop + uva (puva), tanto desde el punto de vista de la letalidad como de la mutagénesis originada por dicho tratamiento. Los mecanismos implicados en la eliminación de las lesiones producidas por el tratamiento agresor se han determinado introduciendo plásmidos lesionados en una serie de estirpes bacterianas con diferentes capacidades de reparación del dna. Se han analizado las características mutagénicas del tratamiento mediante la determinación del tipo y frecuencia de las mutaciones ocurridas en un fragmento de restricción del plásmido. La agresión de pbr322 con 8-mop +uva produce un fuerte efecto letal que puede ser parcialmente atenuado por la actuación de diversos mecanismos bacterianos de reparación del dna, concretamente por el mecanismo de escisión-resíntesis, por la reparación de tipo sos y por un mecanismo aparentemente distinto de los anteriores, aun no caracterizado pero detectable a alta densidad de lesiones. El tratamiento puva produce un incremento notable de la mutagénesis en pbr322, sin embargo este incremento no tiene efectos apreciables sobre la supervivencia de la población plasmídica. Las mutaciones originadas son de tipo puntual y consisten mayoritariamente en sustituciones de bases. Existen regiones del dna con mayor tendencia que otras a incorporar mutaciones; esta tendencia parece mas relacionada con la estructura posiblemente adquirida por el dna lesionado que con el tipo de agente productor de las lesiones.