Localización inmunocitoquímica e histoenzimológica del enzima málico en neoestriado de rata

Resumen

Se realiza un estudio histoenzimológico e inmunocitoquímico para localizar al enzima malico en el neoestriado de la rata. Dichas investigaciones se han efectuado a ambos niveles de microscopia, óptica y electrónica. Para demostrar la actividad del enzima malico se ha desarrollado la metodología que utiliza sales de tetrazolio, con o sin un transportador artificial de iones hidrogeno y electrones, asociados al sustrato y coenzima correspondientes (acido l-malico y nadp). Para demostrar la localización inmunocitoquímica del mencionado enzima, hemos desarrollado el método pap (peroxidasa-antiperoxidasa) en secciones histológicas tratadas con antisuero especifico para el isoenzima malico citosolico. El antisuero especifico fue obtenido a partir de un anticuerpo policlonal contra enzima malico de pollo, originado en conejo. La purificación de dicho antisuero fue realizada según el método de cuatrecasas y anfinsen (1971). La especificidad de dicho antisuero fue comprobada mediante los métodos de inmunodifusión, inmunoelectroforesis y método de hodgson (1985). Las observaciones realizadas han demostrado que existe una gran concentración de enzima malico en el pericarion neuronal y prolongaciones de escasas células (2%), que corresponden a las descritas como neuronas activas solitarias (thomas y pearse, 1963), neuronas nadph-diaforasa (vincent, 1982) o neuronas nadp (martínez-rodríguez y cols., 1984). También se ha observado la existencia de dicho enzima en dentritas postsinápticas de algunas sinapsis del neoestriado. Se considera la posibilidad de que el enzima malico pueda realizar una función íntimamente relacionada con la transmisión nerviosa en esa clase de sinapsis.