Ritmos circadianos y neurotransmisoresEstudios en el cerebro de la rata despierta

Resumen

En la presente tesis doctoral se ha investigado la posible presencia de ritmos circadianos en las concentraciones extacelulares de los neurotransmisores dopamina, acido glutamico y GABA, en el estriado y nucleo accumbens utilizando la tecnica de microdialisis. Se ha investigado tambien la influencia del factor ambiental luz (presencia o ausencia) sobre dichos ritmos. Para ello se ha seguido el siguiente protocolo experimental. Diez-diecisiete dias tras la implantación esterotáxica de cánulas-guia, se llevan a cabo experimentos de microdiálisis en ratas Wistar macho despiertas, durante un ciclo oscuridad: luz: oscuridad (6h:12h:12h), un ciclo oscuridad: luz continua (6h:24h) y un ciclo oscuridad: oscuridad continua(6h:24h). El procedimiento de microdiálisis consiste en una perfusión continua de líquido cefalorraquideo sintético, a un flujo de 1.25 ul/min a traves de una sonda de diseño concéntrico con una pequeña membrana dialítica que entra en contacto con el area a perfundir. La membrana es de una longitud de 4 mm en el caso del estriado y de 2 m en el caso del núcleo accumbens. Este procedimiento permite la recogida de aminoácidos y catecolaminas presentes en el líquido extracelular. Las muestras se recogen cada 30 minutos, a lo largo de un periodo de 30 horas. El contenido en aminoácidos y catecolaminas de las muestras se analiza mediante cromatografia liquida de alta resolución (HPLC) de fase reversa acopado a detección fluorométrica y electroquimica respectivamente. Para el analisis estadistico de las variaciones de las concentraciones en el dializado en las transiciones de luz a oscuridad se utiliza un auste a un modelo sinusoidal junto con un analisis de regresion lineal.