Análisis molecular de la DNA Polimerasa I de Streptococcus pneumoniae

Résumé

Se ha clonado el gen que codifica para una DNA polimerasa de Streptococcus pneumoniae en el sistema homologo de pneumococcus, usando como criterio de selección la actividad exonucleasica de la proteina. La proteina producto del gen clonado en el plasmido recombinante pSM22 se caracterizo como una DNA polimerasa que posee ademas de actividad polimerizante sobre DNA, actividad exonucleasica tanto en direccion 5'->3' como 3'->5'. La polimerasa nativa de unos 100 Kdalton se degrada especificamente en dos fragmentos que retienen las actividades del enzima intacto. Se ha purificado, mediante cromatografia en dos etapas, la polimerasa y sus productos de proteolisis, comprobandose que no es una polimerasa de tipo III y que presenta gran homologia con la DNA polimerasa de E. Coli.