Plásmido pt3.2i de thiobacillus t3.2

Resumen

pT3.21 es un plásmido presente enla bacteria acidófila Thiobaciluus T3.2. La moléculaha sido secuenciada completamente, presentando un tamaño de 15390 pb. pT3.2I posee una estructura dimérica compuesta por dos unidades prácticamente idénticas e 6.4 Kpb denominadas Géminis1 y Géminis2. Adicionalmente, contiene una secuencia de inserción denominada IST3. En función del análisis de homología de secuencia, las unidades Géminis presentan una región de replicación muy similar a la de los plásmidos de la familia ColE2 y el gen deuna posible enzima alcohol deshidrogenasa(gen adh). La región de replicación de pT3.21 posee el gen rnal, que probablemente codifica un RNA antisentido, los genes repA y repB, que pueden codificar sendas proteínas de replicación y el origen vegetativo de replicación, ori. La proteína RepA es capaz de unirse especificamente a la región del DNA que contiene la secuencia ori y es, probablemente, la proteína iniciadora de la replicación. La secuencia de inserción IST3, homóloga a una serie de elementos móviles descritos en diferentes bacterias, presenta copias en el cromosoma de Thiobacillus T3.2 y en otros plásmidos de la bacteria. Esta secuencia es capaz de mediar su transposición en células de E. Coli, donde se comprobó que era responsable de varios reordenamientos plasmídicos. El gen adh, que se expresa activamente en las células de Thiobacillus T3.2, codifica un enzima perteneciente al Grupo I de alcohol deshidrogenasas de cadena larga dependientes de zinc y NAD(P). Este enzima es capaz de oxidar eficientemente el 2,3-butanodiol y el glicerol, como demuestran los ensayos realizados con la proteína purificada. Thiobacillus T3.2 también es portador de un derivado de pT3.2I compuesto por una sola unidad Géminis y la secuencia de inserción IST3.