Efecto de citoquinas y óxido nítrico sobre la gluconeogénesis y síntesis proteica en hepatocitos aislados

Abstract

Comprender la respuesta metabólica a la lesión y la sepsis es importante desde una perspectiva clínica. Alguna de las alteraciones metabólicas que ocurren a continuación de la lesión o de una sepsis grave son esenciales para la supervivencia. Se ha encontrado correlación entre supervivencia y mantenimiento de la fase aguada de la respuesta en el higado. Por el contrario, el excesivo catabolismo muscular que ocurre durante la sepsis puede ir en perjuicio del paciente, retrasando la recuperación, e incrementando el riesgo de complicaciones pulmonares por la implicación de la musculatura respiratoria. Se acepta generalmente que la citoquinas juegan un papel importante en la disfunción hepatocelular que tiene lugar durante la sepsis, y han sido asimismo implicadas en la regulación del estado nutricional. Los mecanismos por los cuales las citoquinas ejercen sus efectos no son totalmente conocidos, aunque diferentes estudios han descrito que los hepatocitos producen óxido nítrico sobre el metabolismo de proteínas e hidratos de carbono en hepatocitos aislados de rata. Tras experimentos previos en los cuales se definió la curva de respuesta plasmática de glucosa, NO y algunas citoquinas después de la administración intraperitoneal de LPS en las ratas, se diseñó un modelo con dos grupos de ratas que fueron sometidos a sendas inyecciones de suero salino o LPS, con posterior aislamiento de los hepatocitos. Posteriormente, se investigó el efecto de TNFalfa e EL-1 sobre la síntesis de proteínas y sobre la gluconeogénesis en hepatocitos aislados tanto de ratas normales como de ratas previamente inyectadas con LPS, y estudir la posible mediación de dicho efecto por NO, CO y cGMP. Las células fueron aisladas, en ambos grupos, por el método de perfusión con colagenasa y cultivadas en RPMI 1640. Tras 24 horas de cultivo, el medio se reemplazó por medio fresco y las células se cultivaron de nuevo, 60 min o 24 hora