El proceso de síntesis de proteínas en aspergillus fumigatus como diana terapéutica de nuevos agentes anti-fúngicos

Resum

La aspergilosis presenta dificulatades para conseguir un rápido diagnóstico y frecuente fracaso terapéutico. Para resolver los problemas de profilaxix y tratamiento deben encontrarse nuevas moléculas con capacidad antifúngica. Aspergillus fumigatus, especie más patógena del género Aspergillus princial responsable de la aspergilosis en sus formas más severas, es el objeto de estudio del presente trabajo. El objetivo es encontrar y caracterizar aspectos bioquímicos, dentro de su fisiología, que sean susceptibles de ser inhibidos eficaz y selectivamente, afectando a su viabilidad celular. Todo ello, deberá traducirse en el desarrollo de ensayos bioquímicos que permitan la búsqueda de compuestos inhibidores a traves de programas de screening. De todas las posibles o potenciales dianas antifúngicas, se ha elegido el proceso de síntesis de proteínas frente a otras dianas más explotadas, como las pared celular o la membrana plasmática. Se ha conseguido la optimización y estandarizqación de las condiciones de cultivo de A. Fumigatus, tanto en matraz como en fermentador, para obtener sistemas libres de células cona ctividad en síntesis de proteínas. Coneste material biológico se ha desarrollado un ensayo de elongación a aprtir de un mensajero sintético, adpatado a un formato que permite el desarrollo de programas de HTS. El procesode screeing realizado ha rendido melóculas que finalmente se han mostrado no selectivas o tóxicas, por lo que no han podido progresar a estudios posteriores. Analizado el efecto de los derivados de Sordarina, se ha puesto en evidencia que producen un efecto de inhibición reversible en el proceso de síntesis de proteínas, responsable del efecto fungistático del crecimiento de A. Fumigatus, demostrándose que la diana molecular dentro del ciclo de elongaciónd e estos agentes antifúngicos en A. Fumigatus es el factor de elongación EF-2. De todos los derivados analizados, el dierivad