Análisis molecular de los mecanismos de transmisión de potyvirus por pulgones

Resumo

En la presente tesis hemos abordado el estudio de los aspectos moleculares que gobiernen la transmisión por pulgones de los potyvirus a través del análisis de las dos proteínas implicadas en este proceso: la proteína de la cápsida (CP) y el factor de adquisición (HC). Hemos estudiado las propiedades serológicas de una colección de aislados de pimiento del virus Y de la patata. Los métodos serológicos y el análisis de la secuencia de aminoácidos de la CP no nos han permitido diferenciar ni entre patotipos 0, 1 y 1-2 ni entre aislados de pimiento con distintas propiedades de transmisión, si bien fue posible discriminar éstos de los aislados de tabaco y patata. El alto grado de homología en la CP de los patotipos de pimiento parece indicar que la capacidad para sobrepasar la resistencia impuesta por los genes pvr2 de pimiento radica en una región del genoma distinta de la CP. Por otra parte, todos ellos presentan en su CP el triplete DAG implicado en la transmisión de los potyvirus por pulgones. Este dato confirma que la pérdida de transmisibilidad de PVY-0 NAT y -1 es debida a una alteración en su factor HC. El estudio de las propiedades de transmisión vectorial de una aislado perteneciente al patotipo 1-2 (PVY-1-2) muestra que no pudo ser transmitido en experimentos de transmisión por pulgones planta a planta si bien se consiguieron altas frecuencias de transmisión en ensayos de adquisición a través de membranas en presencia de un factor HC heterólogo funcional. Su proteína HC revela la presencia de dos cambios de aminoácidos con respecto a la de PVY-0 AT (Arg a Gln en posición 89 y Met a lle en posición 152) que podrían ser los responsables de su pérdida de transmisibilidad. El análisis comparativo entre potyvirus del extremo amino terminal del factor HC revela la presencia de un dominio altamente conservado rico en residuos de Cys y en el que se encuentran además del motivo KITC conocido po