Estudio de los receptores purinérgicos presentes en cultivos de astrocitos cerebelosos

Resumen

En los últimos años se ha demostrado que el ATP actua como neurotransmisor en el SNC, al igual que esta implicado en la comunicación entre las neuronas y las celulas gliales adyacentes. Por ello, pensamos que las celulas gliales, concretamente los astrocitos de cerebelo podrian tener receptores para ATP y dinucleotidos. En este trabajo hemos caracterizado los diferentes receptores purinérgicos que se expresan en los astrocitos individuales. Todos estos estudios se han llevado a cabo con cultivos purificados de astrocitos tipo 1, los cuales se identificaron por un marcaje especifico con anticuerpos frente a la proteina glial fibrilar acida (GFAP+). Mediante tecnicas microfluorimetricas con la sonda fluorescente fura-2, hemos observado que todos los astrocitos respondian a estimulaciones con ATP movilizando calcio de reservorios intracelulares. Estas respuestas de ATP se producen por su interacción con receptores metabotrópicos P2Y. Todos los astrocitos coexpresan receptores P2Y1, P2Y2/P2Y4, los cuales se acoplan a la activación de la fosfolipasa C a traves de las distintas proteinas G. Una subpoblacion de astrocitos presentan además receptores de pirimidinas, del tipo P2Y6. Asimismo, hemos demostrado que los astrocitos tambien expresan receptores de adenosina del tipo A2B acoplados a la activacion de la adenilato ciclasa, cuya estimulacion potencia las señales intracelulares de calcio inducidas por ATP. Finalmente, los astrocitos cerebelosos tambien presentan un receptor especifico para el dinucleotido pentafosfato, Ap5A. La estimulacion de este receptor con concentraciones nanomolares de Ap5A produce la activacion de las proteinas ERKs e induce la potenciacion de las señales de calcio inducidas por ATP. Esta potenciación es diferente de la que se produce con adenosina ya que mantiene durante largos periodos de tiempo y se mimetiza por EGF. Por el contrario la inducida por adenosina era reversible. Todos estos datos sugieren que e