Cribado farmacológico contra trypanosoma cruzi. Estandarización y aplicación de nuevas técnicas

Abstract

Trypanosoma cruzi es un protozoo flagelado causante de la Enfermedad de Chagas. Acutalmente se estima que entre 16 y 18 millones de personas en Sudamérica padecen esta enfermedad. El control de la misma se está logrando mediante programas de erradicación del vector y control de los bancos de sangre. Pero todavía no se ha logrado un tratamiento eficaz. Los fármacos existentes, nifurtimox y benzonidazol, sólo son activos en la fase aguda y producen graves efectos secundarios en el paciente, por lo que la quimioterapia de la Tripanosomosis Americana sigue siendo un campo abierto a la investigación. En este trabajo se ha realizado el cribado faramcológico de cuatro series químicas: Derivados de tetrahidro-2H 1,3,5-tiadiazin-2-tiona-3,5-disustituidos, derivados de 1,1-dióxido de 1,2,6-tiadiazin-3,5-diona, derivados de nitro-ariliden malononitrilos y 5-aril-metilidenamino derivados de 2-toluensulfonamida. Se ha evaluado la actividad in vitro, citotoxicidad inespecífica y efectividad in vivo. Por otra parte se han desarrollado y estandarizado técnicas para la determinación de la actividad de productos de síntesis sobre cultivos de epimastigotes. En primer lugar, un método colorimétrico, empleando bromuro de 3-(4,5-dimetiliazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolio (MTT), capaz de evaluar la viabilidad de un cultivo sin necesidad del teidoso y subjetivo recuento microscópico. En segundo lugar, un método que utilizando técnicas de biología molecular, relaciona la sobre-expresión de Hsp60 (Proteína de Choque Térmico) de estos parásitos, con una actividad del producto. Por útlimo, se ha empleado microscopía electrónica de transmisión para evaluar a nivel ultraestructural los daños que se producen al poner en contacto parásito y compuesto.