Inducción a embriogénesis en polencaracterización celular y expresión de proteínas de estrés

Resumen

El polen cultivado in vitro, tras someterlo a un tratamiento de estrés, es capaz de desviarse de su ruta de desarrollo gametofítico hacia una nueva vía esporofítica, proceso denominado embriogénesis del polen, por el cual el grano de polen inmaduro o microspora se multiplica para dar lugar a un embrión y posteriomente a una planta haploide. Las plantas haploides y doble-haploides son de enorme interés para la obtención de líneas isogénicas en mejora vegetal de una forma rápida además de para estudios genéticos y de mutagénesis. El objetivo de esta Tesis Doctoral es el estudio, desde el punto de vista celular, del proceso de inducción a la embriogénesis haploide. Como modelo experimental se han utilizado microsporas aisladas de anteras de Brassica napus inducidas y cultivadas in vitro durante las primeras etapas del proceso de aislamiento e inducción y el posterior desarrollo embriogénico. Tras la inducción, en la célula se suceden gran cantidad de acontecimientos, cambios en determinados componentes citoplásmicos. Aumenta la síntesis específica de ciertas proteínas implicadas en las distintas respuestas que se originan, disparándose cascadas de transmisión de señales de estrés al interior celular. En esta Tesis se ha caracterizado los cambios celulares, citplásmicos y en los compartimentos nucleares, originados por la inducción a embriogénesis. Se han encontrado determinadas estructuras que pueden constituir marcadores celulares del proceso. Asimismo se han descrito cambios en la expresión y localización subcelular de diferentes proteínas de estrés, específicamente proteínas de choque térmico (HSP 70 y HSP 90), implicadas en la respuesta mediada por dicho tratamiento. Durante el proceso, se han detectado variaciones en la expresión in situ de varios elementos de las cascadas de MAP quinasas encargadas de la transmisión de señales extracelulares de estrés, encontrándose diferentes patrones