Regulación por insulina de los enzimas clave de la vía glucolítica/gluconeogénica en cultivo primario de hepatocitos de rata obesa zucker (fa/fa)

Resumen

Los hepatocitos de rata en cultivo primario sufren un proceso de desdiferenciación. Por ello, en una primera etapa estudiamos el perfil fenotípico de la vía glucolítica/gluconeogénica en hepatocitos en cultivo. Así, observamos que se producía una rápida disminución de los nivels de actividad y mRNA de los enzimas clave de la vía gluconeogéncia durante la evolución del cultivo. Estos cambios llevan a una marcada disminución de la capacidad gluconeogénica de los hepatocitos en cultivo en un plazo de 24 horas. Por otra parte se estudió la resitencia a insulina, tanto a corto como a largo plazo, en cultivo primario de hapatocitos de ratas obesas Zucker (fa/fa). Estos mantienen en cultivo primario su fenotipo característico a nivel de la vía glucolítica/gluconeogéncia, durante al menos 24 horas. Además, presentan resistencia de la vía glucolítica/gluconeogéncia a la modulación por sinsulina en sus acciona a corto plazo, fque se manifesta en ausencia de inhibición significativa por insulina de la gluconeogénesis y de la producción hepática de glucosa (glucogenolisis más gluconeogénesis), acompañada de una falta de activación de la PFK-2 y ausencia de cambios en la concentración de F-2,6-P2. En cuanto a las acciones a largo plazo de la insulina, se observó resistencia a la modulación de la actividad PEPCK y la expresión de su correspondiente mansajero. Por último, se estudiaron las vías de señalización implicadas en la activación a corto plazo de la PK-L por insulina. Así, se observó que en este proceso se requiere la activación de las vías de señaización de la p44/p42 MAPK y de la PI3-K. Además, es posible que sea necesaria la activación de la PKB, mientras que podemos descartar la participación de la p70 S6-K.