Mapeo epitópico del alérgeno principal del polen de olivo

Resumen

El trabajo de investigación presentado en esta memoria ha tenido como objetivo la localización de los determinantes antigénicos y alergénicos del alergeno principal del polen de olivo, Ole e 1. Este estudio se ha abordado mediante el empleo de diversas estrategias y herramientas inmunológicas. Los estudios con anticuerpos monoclonales y policlonales específicos de Ole e 1 han permitido la detección de diferentes determinantes antigénicos de la proteína algunos de los cuales solapan con las regiones de unión de los anticuerpos IgE presentes en los sueros de pacientes alérgicos a olivo. La mayor parte de estos determinantes presentan un carácter discontinuo cómo se ha demostrado mediante estudios inmunológicos sobre la proteína modificada químicamente. El alto poliformismo detectado en la secuencia de aminoácidos de Ole e 1 así como la existencia de proteínas homólogas a ella en los pólenes de otras oleáceas, tales como la lila y el aligustre, ha permitido la utilización de otras aproximaciones en este estudio. La producción de estas proteínas homólogas y de diversas isoformas de Ole e 1 como moléculas recombinantes en la levadura Pichia pastoris nos ha permitido disponer de moléculas homogéneas y en grandes cantidades para la realización de estudios comparativos, tanto in vivo como in vitro, de las propiedades inmunológicas de estas moléculas. De estos estudios se ha deducido por un lado, una gran variabilidad de los epítopos reconocidos por los distintos pacientes sobre Ole e 1, y por otro, se han identificado isoformas de Ole e 1 que presentan una reactividad disminuida frente a los sueros de pacientes alérgicos, lo cual es de especial relevancia para fines terapéuticos. Por último, la obtención de péptidos sintéticos y recombinantes de Ole e 1 ha facilitado la localización de diversos determinantes antigénicos en la secuencia de la proteína, así como la identificación de un epítopo alergénico localizado en el extremo C-terminal de la molécula. Los péptidos recombinantes producidos presentan una escasa capacidad de unión a las IgE de pacientes sensibles a olivo, reteniendo sin embargo buena parte de los epítopos IgG de la molécula lo que los convierte en potenciales candidatos en el diseño de nuevas formas de terapia de sensibilización a Ole e 1. Los resultados obtenidos en este trabajo han permitido profundizar en el conocimiento de la alergenicidad de Ole e 1, así como abrir el paso al diseño de futuras estrategias en la diagnosis y terapia de la sensibilización al polen de olivo.