Caracterización fenotípica y funcional de los precursores de linfocitos T de rata

Abstract

EN EL PRESENTE TRABAJO HEMOS LLEVADO A CABO UNA CARACTERIZACION FENOTIPICA, POR CITOMETRIA DE FLUJO MULTIPARAMETRICA, Y DE LAS POTENCIALIDADES PARA GENERAR CELULAS T, NK Y DENDRITICAS (DC), EN XENOCULTIVOS ORGANOTIPICOS RATA/TIMO FETAL DE RATON-SCID, DE LAS POBLACIONES MAS INMADURAS DE TIMO ADULTO Y FETAL Y DE CELULAS LINFOHEMATOPOYETICAS DE HIGADO FETAL DE RATA, ENCONTRANDO QUE TALES POBLACIONES PRESENTAN UN FENOTIPO CD45+CD8-CD4-TCR/CD3-CD2-CD44+CD53+THY-1+. EN EL TIPO FETAL, ADEMAS, ENCONTRAMOS QUE TAL POBLACION CONTIENE CELULAS CON UNA BAJA EXPRESION DE NKR-P1A, LAS CUALES SON FUNDAMENTALMENTE CELULAS COMPROMETIDAS CON EL LINAJE NK, AL CONTRARIO DE LO HATA AHORA DESCRITO EN RATON. TAL POBLACION NO FUE ENCONTRADA EN TIMO ADULTO NI EN HIGADO FETAL AUNQUE EN ESTE ULTIMO EXISTEN, IGUALMENTE, ALGUNAS CELULAS COMPROMETIDAD CON EL LINAJE NK. POR OTRA PARTE, DEMOSTRAMOS QUE LA VIA PRINCIPAL DE MADURACION T TRANSCURRE A TRAVES DE UN PROGENITOR BIPOTENTE COMUN A CELULAS T Y DC QUE ES ENCONTRADO, TAMBIEN, EN HIGADO FETAL, ALGO PREVIAMENTE NO DEMOSTRADO EN OTRAS ESPECIES. HEMOS CLONADO UN FRAGMENTO CDNA DE CADENA pre-TCRa DE RATA Y DEMOSTRADO LA PRESENCIA DE TRANCRITOS ARN PARA ESTA Y TCRB MADURA NO SOLO EN LAS POBLACIONES TIMICAS CD2-, LO QUE DEMUESTRA UN COMPROMISO T PREVIO A LA ADQUISICION DE CD2 EN LA DIFERENCIACION INTRATIMICA, SINO TAMBIEN EN LA POBLACION DE HIGADO FETAL LO QUE PONE DE MANIFIESTO QUE EL COMPROMISO T PUEDE TENER LUGAR EXTRATIMICAMENTE. ESTE HECHO ES POSTERIORMENTE CONSTATADO AL DEMOSTRAR LA APARICION DE CELULAS T INMADURAS CD2+CD8+ EN CULTIMOS ORGANOTIPICOS DE HIGADO FETAL. FINALMENTE, DEMOSTRAMOS QUE EL ESTROMA TIMICO FETAL INDUCE MAS CELULAS TCRaB MADURAS CD8-SP QUE CD4-SP,INDEPENDIENTEMENTE DEL TIPO DE PROGENITOR T UTILIZADO, LO QUE PONE DE MANIFIESTO LA IMPORTANCIA DEL ESTROMA EN LA GENERACION DEL RATIO CD4:CD8.