Caracterización de dominios implicados en el control del transporte en la proteína desacoplante de las mitocondrias del tejido adiposo pardo

Zusammenfassung

La elevada actividad termogénica del tejido adiposo pardo se debe a la actividad de la proteína desacoplante (UCP) que se localiza en la membrana interna mitocondrial. La UCP desacopla la respiración de la síntesis de ATP, ya que permite la re-entrada de los protones a la matriz mitocondrial. La actividad de la UCP se encuentra regulada por nucleótidos de purina (inhibidores) y ácidos grasos (activadores). Existe un conocimiento muy limitado acerca de la organización estructural de la UCP y de los dominios implicados en el transporte, así como en su regulación por los ácidos grasos y los nucleótidos. Por esta razón, el objetivo primordial de esta Tesis ha sido el estudio de dominios que participan en el control del transporte en la proteína. Los resultados recogidos en esta memoria de Tesis muestran la identificación de dos dominios en la UCP importantes para la regulación del transporte en la proteína. Por un lado, se ha demostrado que el extremo C-terminal participa en la modulación de la acción de los ácidos grasos y a partir del estudio de un mutante que es el doble de sensible a los ácidos grasos que la UCP salvaje, se han obtenido detalles sobre la función de la proteína en ausencia de ácidos grasos. Por otro lado, la región comprendida entre la 5 y 6 alfa hélice transmembranal ha resultado ser clave para el control de la actividad de la proteína, no sólo desde el punto de vista de sus ligandos reguladores, sino incluso para determinar las especies que va a transportar. Finalmente, se demuestra que también los dominios que conectan las hélices transmembranales 1 y 2 y 3 y 4, participarían junto a la región entre las hélices 5 y 6, en el control del transporte en la UCP.