Construcción de plasmidos capaces de transformar de forma no integrativa candida albicans y saccharomyces cerevisiae

Resumen

EN ESTE TRABAJO SE HA AISLADO UN FRAGMENTO DE DNA DE C. ALBICANS QUE CONFIERE A PLASMIDOS INTEGRATIVOS DE S.CEREVISIAE CAPACIDAD DE REPLICACION AUTONOMA. LOS PLASMIDOS ASI CONSTRUIDOS TRANSFORMAN CON ALTA FRECUENCIA TANTO C.ALBICANS COMO S.CEREVISIAE, MUESTRAN UNA NOTABLE INESTABILIDAD MITOTICA Y SE RECUPERAN FACILMENTE DE LAS ESTIRPES TRANSFORMADAS DEMOSTRANDO SU CARACTER AUTONOMO. HEMOS INTRODUCIDO EN ESTOS VECTORES UN MARCADOR DE SELECCION SEMIDOMINANTE (TCM 1) QUE CONFIERE RESISTENCIA AL ANTIFUNGICO TRICODERMOL Y QUE PERMITE POR TANTO, LA TRANSFORMACION DE ESTERIPES DE LEVADURA CARENTES DE MARCADORES GENETICOS. CONTAMOS PUES, CON VECTORES DE CLONACION QUE PERMITEN LA INTRODUCCION DE MATERIAL GENETICO TANTO EN C.ALBICANS COMO EN S. CEREVISIAE Y EN E.COLI. POR OTRO LADO, HEMOS AISLADO UN FRAGMENTO DE CDNA DE C.ALBICANS QUE PRESENTA UNA ALTA HOMOLOGIA CON LA FAMILIA DE LAS ATPASAS DE MEMBRANA DE S.CEREVISIAE. LA CARACTERIZACION DE ESTA SECUENCIA PERMITIRA DETERMINAR SI EN REALIDAD CODIFICA PARA UNA PROTEINA QUE ACTUA COMO BOMBA DE CATIONES.