Caracterización de la región regulatoria 5' del gen slt2 que codifica una map quinasa de saccharomyces cerevisiae

Resumen

En esta tesis doctoral, se caracteriza la región regulatoria 5' del gen slt2, una map guinasa esencial para la integridad celular. Para ello, se ha analizado la secuencia de esta zona y localizado posibles elementos de regulación, así como estudiado la expresión utilizando un gen marcador y relacionando la expresión del gen slt2 con la capacidad de complementación del fenotipo mutante slt2. Utilizando tanto técnicas de biología molecular como bioquímicas, se ha determinado: - que la transcripción del gen slt2 se inicia en la a-58 y que el elemento tata completo es necesario para la transcripción del gen; - que el gen slt2 no presenta regulación transcripcional ni por factores sexuales ni a 37 grados c; - que todos los fragmentos de promotor estudiados desde 1.500 pb a 210 pb, promueven una expresión capaz de complementar el fenotipo mutante y producir unos niveles de actividad -galactosidasa muy similares en todos los casos. Sin embargo, la eliminación de un fragmento interno de 607 pb, portador de una secuencia activadora, provoca la perdida de actividad enzimática. -que los niveles de transcripción del gen slt2 aumentan en la fase g2; -que el dominio catalítico de slt2p es suficiente para su actividad, mientras que el dominio carboxiloterminal es dispensable.