Caracterización, propiedades y aplicaciones biotecnológicas de la 2-haloácido deshalogenasa de azotobacter sp. Análisis comparativo con la enzima homóloga de pseudomonas

Abstract

La estirpe rc26 del genero azotobacter, ha sido aislada del suelo por su capacidad para utilizar acido monocloroacetico como sustrato de crecimiento. A partir de los extractos celulares, purificamos y caracterizamos una haloacido deshalogenasa activa sobre los ácidos monocloroacetico y 2-monocloropropionico. La enzima es especifica para la forma l del acido 2-monocloropropionico dando como resultado de la reacion un producto con la configuración invertida. Hemos estudiado la posibilidad de desarrollar un sistema basado en la inmovilización de la enzima en una matriz solida para utilizarlo en procesos de eliminación de productos tóxicos y en la obtención de moléculas ópticamente activas, como d y l-lactato y d-monocloropropionico. La enzima purificada fue inmovilizada sobre deae-sephacel resultando ser mas estable que la enzima soluble. El comportamiento del complejo deshalogenasa/deae- sephacel en un reactor de flujo continuo, muestra que la enzima es activa incluso cuando fluye a su través concentraciones de sustrato que dan lugar a la inhibición de la enzima soluble. De forma paralela se realizo un estudio comparativo con la enzima homologa procedente de otra estirpe bacteriana aislada del suelo y perteneciente al genero pseudomonas.