Síntesis de análogos de aminoácidos y estudio de las alteraciones del centro activo de alfa-quimotripsina modificada

Résumé

La alta estereoespecificidad de las enzimas y la ausencia de reacciones secundarias en comparación con los catalizadores clásicos ha hecho necesario el desarrollo de biocatalizadores estables frente a diversos efectores como medios orgánicos, pH, temperatura, etc. Buscando para ello derivados modificados- inmovilizados de enzimas. Estos derivados muestran diferencias respecto a la enzima libre y es interesante realizar estudios fundamentales a fin de correlacionar las alteraciones con las modificaciones del centro activo de la enzima. En esta tesis doctoral se trata de explicar la alteración de la quimioselectividad observada cuando se utiliza alfa-quimotripsina modificada químicamente utilizando monometoxipolietilenglicol activado por 2,4,6-triclorotriazina y relacionarla con ligeras modificaciones del centro activo, empleándose para ello metodologías como qsar, mecánica molecular, etc. Para estos estudios fundamentales de actividad enzimática se han sintetizado una serie de analogos de fenilalanina con objeto de relacionar la estructura del sustrato con la interacción que tiene lugar con la enzima modificada. Se han realizado ensayos de hidrolisis de estos esteres, así como síntesis de péptidos utilizándolos como donadores de acilo en diferentes condiciones. La conclusión principal a destacar seria que se ha propuesto un modelo de centro activo de alfa-quimotripsina modificada químicamente que se ha obtenido por complementación de los sustratos "sonda" empleados y que es predictivo para sustratos apolares pudiéndose determinar a priori, si un determinado ester va a ser o no sustrato adecuado para la enzima mediante cálculos sencillos de mecánica molecular.