Estudio de la proteína de fusión del virus respiratorio sincitial humanocaracterización de un epítopo implicado en la neutralización del virus

Resumen

EL VIRUS RESPIRATORIO SINCITIAL (VRS) HUMANO ES EL AGENTE CAUSAL MAS IMPORTANTE DE ENFERMEDAD DE LAS VIAS RESPIRATORIAS EN NIÑOS DE CORTA EDAD. HASTA LA FECHA NO EXISTE NINGUNA VACUNA CONTRA EL VIRUS. EN ESTA TESIS SE HA INICIADO EL ESTUDIO DE LA RELACION ENTRE LA ESTRUCTURA DE LA PROTEINA DE FUSION (F), UNA DE LAS DOS GLICOPROTEINAS DEL VIRUS, CON SU ANTIGENICIDAD. PARA ELLO, SE HA DETERMINADO LA ESTRUCTURA PRIMARIA DE LA PROTEINA F DEL VIRUS LONG, CONTRA LA QUE SE HABIAN PREPARADO ANTICUERPOS MONOCLONALES (ACM). DE LA SECUENCIA DE AMINOACIDOS DEDUCIDA SE OBSERVA QUE EXISTE UNA GRAN HOMOLOGIA CON LA PROTEINA F DE OTROS VIRUS VRS (92-98%), INDICANDO QUE LOS CAMBIOS DE AMINOACIDOS ESTAN FUERTEMENTE RESTRINGIDOS PARA EL MANTENIMIENTO DE SU FUNCION. UNO DE LOS ACMS, EL 47F, QUE RECONOCE UN EPITOPO ENTRE DISTINTOS AISLADOS NATURALES Y QUE MUESTRA UN ALTO INDICE DE NEUTRALIZACION "IN VITRO", PERMITIO SELECCIONAR 5 VARIANTES ANTIGENICOS DEL VIRUS LONG RESISTENTES A LA NEUTRALIZACION POR DICHO ANTICUERPO. POR SECUENCIACION DEL MRNA DE ESTOS 5 VARIANTES SE HAN LOCALIZADO, POR PRIMERA VEZ EN VRS, DOS RESIDUOS ESENCIALES EN EL EPITOPO RECONOCIDO POR UN ACM NEUTRALIZANTE. PARA EVALUAR EL PAPEL QUE DICHO EPITOPO TIENE EN LA INMUNOGENICIDAD GLOBAL DE LA PROTEINA F SE HAN PREPARADO VIRUS VACUNALES RECOMBINANTES QUE EXPRESAN LA PROTEINA F DEL VIRUS LONG O PROTEINAS F CON MUTACIONES EN DICHO EPITOPO. LOS RESULTADOS INDICAN QUE UNA MUTACION PUNTUAL EN DICHO EPITOPO NO AFECTA A LA INMUNOGENICIDAD DE LA PROTEINA F. SIN EMBARGO, UNA PROTEINA F CON 5 MUTACIONES ADICIONALES TIENE ALTERADA DRASTICAMENTE SU INMUNOGENICIDAD. ESTAN EN MARCHA EXPERIMENTOS ENCAMINADOS A DETERMINAR QUE RESIDUO(S) ES(SON) RESPONSABLE(S) DE DICHA ALTERACION.