Captura, distribución e interacción a nivel intracelular del lipopolisacarido de escherichia coli en pneumocitos tipo ii de rata

Resumen

La presente tesis doctoral se centro en el estudio de la distribución a nivel intracelular del lipopolisacarido de escherichia coli en pneumocitos tipo ii aislados y en la determinación de los posibles sistemas celulares implicados en la acción directa de las endotoxinas bacterianas en este tipo celular, cuya funcionalidad resulta seriamente alterada durante los procesos de "shock" endotóxico. Los pneumocitos tipo ii de rata experimentan cambios ultraestructurales drásticos cuando son tratados in vitro con la endotoxina de escherichia coli (lipopolisacarido, lps). Esta toxina bacteriana se une preferentemente a las microvellosidades de los pneumocitos, caracterizadas por presentar un glicocalix abundante y por contener el receptor de la aglutinina de maclura pomifera (mpa). La unión del lps a estas zonas de membrana inhibe la posterior unión de esta lectina. Solo dos bandas proteicas de las fracciones enriquecidas en membrana plasmática de pneumocitos tipo ii son capaces de unir lps, una vez unidas a nitrocelulosa tras su procesamiento por electroforesis en gel de poliacrilamida. Sus pesos moleculares aparentes son de 35 y 50 kd, y podría tratarse de receptores específicos para la endotoxina de la membrana plasmática de este tipo celular. En la fracción soluble obtenida a partir de suspensiones de pneumocitos unieron la endotoxina tres bandas proteicas mas, de 25, 50 y 200 kd. Después de interaccionar con la membrana plasmática, el lps entra en la célula e interacciona con mitocondrias, cuerpos lamelares y retículo endoplásmico, se introduce en el núcleo celular y se acumula en zonas de heterocromatina no condensada. Asimismo, la endotoxina destruye la organización microtubular de los pneumocitos aislados e inhibe la polimerizacion de las proteínas microtubulares in vitro. El lipopolisacarido ejerce este efecto despolimerizante uniéndose a tubulina, aunque también interacciona con la proteína asociada al microtubulo, map-2. Los r