Caracterización de glicoproteínas por cromatografía de afinidad en lectinas inmovilizadas. Estudio de los factores implicados en la interacción fibrinógeno-sepharosa-lectina

Abstract

LAS LECTINAS PUEDEN RECONOCER DIFERENCIAS MUY SUTILES EN ESTRUCTURAS COMPLEJAS DE OLIGOSACARIDOS Y POR TANTO PUEDEN SER UTILIZADAS PARA LA PURIFICACION Y CARACTERIZACION DE GLICOPROTEINAS EN BASE A LA ESTRUCTURA DE SU CARBOHIDRATO. SIN EMBARGO, EL EMPLEO ADECUADO DE LA CROMATOGRAFIA DE AFINIDAD EN LECTINAS INMOVILIZADAS REQUIERE EL ESTUDIO PREVIO DE LOS DISTINTOS FACTORES QUE INTERVIENEN EN EL PROCESO Y QUE DEPENDEN DEL SOPORTE UTILIZADO, DE LA TECNICA DE INMOVILIZACION Y DE LA PROPIA INTERACCION GLICOPROTEINA-LECTINA. EN ESTE TRABAJO SE HA ESTUDIADO LA INFLUENCIA DE ESTOS FACTORES EN LA INTERACCION DEL FIBRINOGENO Y SUS DERIVADOS CON LECTINAS INMOVILIZADAS. LOS RESULTADOS OBTENIDOS PERMITEN ESTABLECER UNAS CONDICIONES OPTIMAS DE INMOVILIZACION DE LECTINAS DE MANERA QUE ESTEN MINIMIZADAS LAS INTERACCIONES INESPECIFICAS Y FAVORECIDAS LAS ESPECIFICAS. POR OTRA PARTE, EL ESTUDIO COMPARADO DE LA INTERACCION EN SOLUCION DE FIBRINOGENO CON LAS LECTINAS Y LA CAPACIDAD DE LAS LECTINAS INMOVILIZADAS PARA RETENER FIBRINOGENO Y SUS FRAGMENTOS ES DE GRAN UTILIDAD A LA HORA DE PREDECIR EL COMPORTAMIENTO CROMATOGRAFICO, EN UNA LECTINA INMOVILIZADA. DE GLICOPROTEINAS CONOCIDO EL NUMERO Y ESTRUCTURA DE SUS CADENAS DE CARBOHIDRATO. ESTO NOS PUEDE PERMITIR DISEÑAR ESTRATEGIAS DE PURIFICACION DE GLICOPROTEINAS UTILIZANDO LECTINAS INMOVILIZADAS Y, POR OTRA PARTE, ESTABLECER LA ESTRUCTURA DEL CARBOHIDRATO DE UNA GLICOPROTEINA, CONOCIDO SU COMPORTAMIENTO CROMATOGRAFICO EN DIVERSAS LECTINAS INMOVILIZADAS.